Actividad in vitro y exvivo de combinaciones de fármacos liposomados frente a M. tuberculosis, complejo M. avium y M. abscessus. Análisis de la producción de biofilm.

Duración

01/01/2017 - 31/12/2021

Coordinador

Julià González Martín

Financiadores

Instituto de Salud Carlos III y Unión Europea. Cofinanciado por el Fondo Europeo de Desarrollo Regional (FEDER). “Una manera de hacer Europa”

Este proyecto tiene los siguientes objetivos:

1. Estudiar el efecto de las combinaciones de fármacos: a) etambutol+levofloxacino+amikacina y b) pretomanid+clofazimina+levofloxacino, en forma libre y liposomal, en cepas sensibles y resistentes de M.tuberculosis;
2. Diseño de un antibiograma de Micobacterias no tuberculosas (MNT) dirigido a tratamientos nebulizados para los aislados clínicos de M.avium, M.intracellulare y M.abscessus;
3. Estudiar el efecto de las siguientes combinaciones de fármacos: a) claritromicina+etambutol+amikacina en los dos primeros y b) tigeciclina+imipenem+amikacina en el último, en forma libre y liposomal con los mismo métodos descritos en el primer objetivo;
4. Evaluar la producción y cuantificación de biofilm en cepas de M.avium, M.intracellulare y M.abscessus. Determinar la concentración mínima de erradicación del biofilm (CMEB) en estos últimos frente a los fármacos propuestos.

Metodología: Se estudiaran 20 cepas de M. tuberculosis y 30 de cada una de las especies de micobacterias no tuberculosas (MNT) seleccionadas, M. avium, M. intracellulare y M. abscessus. Se analizará el efecto de las combinaciones propuestas para M. tuberculosis y MNT utilizando los métodos in vitro curvas de letalidad y exvivo modelo de infección en macrófagos humanos.

Después se determinará las concentraciones intracelulares de los fármacos en forma libre y liposomal en el modelo ex vivo. Se determinarán las concentraciones mínimas inhibitorias para las MNT con el método de microdilución usando medio líquido Middlebrook 7H9. En estas mismas cepas se evaluará la producción de biofilm mediante el método de tinción con cristal de violeta. La concentración mínima de erradicación de biofilm (CMEB) se estudiará con el sistema Calgary.

Financiación